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拉曼光譜技術(shù)在血脂異常診斷試驗(yàn)中的應(yīng)用
血脂異常通常指由于脂質(zhì)代謝紊亂而引起血清中血脂成分含量的異常變化,又稱高脂血癥。高脂血癥促進(jìn)脂質(zhì)在血管內(nèi)皮下沉積而形成斑塊,晚期斑塊破裂形成血栓,堵塞冠狀動(dòng)脈或腦血管造成心肌梗死或腦卒中,是心腦血管**的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素。目前,中國成年人高脂血癥患病率高達(dá)40.4%,隨著人群血脂水平的升高,我國心血管病事件在2010—2030年預(yù)計(jì)增加920萬,所以提高血脂異常的早期檢出率、控制血脂水平對(duì)減少心血管病事件的發(fā)生至關(guān)重要。
拉曼光譜基于分子振動(dòng)產(chǎn)生,可以反映分子的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象,從分子水平反映組織病理變化,是一種基于分子水平的檢測手段。**的發(fā)生與分子蛋白質(zhì)、脂類、核酸、糖等各種成分的改變相關(guān),而光譜技術(shù)是了解這些物質(zhì)變化*靈敏的技術(shù)。通過激光散射獲得拉曼光譜圖譜,根據(jù)波峰的位置、強(qiáng)度、譜線的寬度,可獲得這些大分子物質(zhì)的含量及結(jié)構(gòu)信息。拉曼光譜技術(shù)可以探尋血清中與**相關(guān)的大分子物質(zhì)的譜線特征,從分子水平研究與**相關(guān)的物質(zhì)在血清中的濃度變化,從而進(jìn)行**的診斷。
大多數(shù)高脂血癥患者無任何癥狀和異常體征表現(xiàn),常常是在進(jìn)行血液生化檢驗(yàn)時(shí)被發(fā)現(xiàn),這并不利于血脂異常的早期發(fā)現(xiàn),而且現(xiàn)有的診斷方法主要靠血常規(guī)檢測,此方法雖然普及且簡便,但仍然是一項(xiàng)有創(chuàng)的檢查方法。拉曼光譜具有對(duì)樣品破壞程度低、迅速、操作簡便、專一性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)??梢宰鳛橐环N無創(chuàng)、高效的血脂異常篩查方法用于**早期檢查。
惡性腫瘤
惡性腫瘤目前已成為人類健康*大的威脅。由于缺乏高效的癌癥篩查手段,以及對(duì)“早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早**”等**策略認(rèn)知不足,我國癌癥患者5年生存率僅為30.9%。目前,檢測腫瘤的3種主要方法為腫瘤標(biāo)志物檢測、影像學(xué)診斷和組織病理學(xué)診斷,其中組織病理學(xué)診斷是腫瘤診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但也是一種有創(chuàng)的診斷方式,不僅要求檢測人員具有豐富的經(jīng)驗(yàn),而且診斷時(shí)效性差。
拉曼光譜可以在分子水平上揭示腫瘤組織與正常組織結(jié)構(gòu)之間的差異,且不會(huì)改變樣品的性狀,故在腫瘤的良惡性判別、腫瘤的亞型分類、切片病理診斷等方面被廣泛應(yīng)用。腫瘤生物標(biāo)記物檢測是一種非侵入性的快速分析技術(shù),而且腫瘤標(biāo)記物濃度低,化學(xué)成分復(fù)雜,可以利用拉曼光譜技術(shù)檢測血清腫瘤標(biāo)志物成分,以彌補(bǔ)傳統(tǒng)病理活檢的局限性,完成癌癥的早期篩查。
病毒檢測
目前病毒感染的診斷方法有多種,主要為**檢測、核酸檢測、熱成像檢測等。其中核酸檢測是在新型冠狀病毒感染診斷中使用*多,也被世界公認(rèn)的重要方法。有研究者在拉曼光譜儀的532nm激光光源下檢測健康人、乙型肝炎(以下簡稱乙肝)和丙型肝炎(以下簡稱丙肝)患者血清。與健康人血清相比,峰值在1006、1157、1513cm-1處,乙肝和丙肝患者血清光譜的峰值隨著強(qiáng)度的降低而發(fā)生藍(lán)移。研究發(fā)現(xiàn)乙肝患者血清中的625、678、748、810、820、950、1003、1018、1275cm-1波峰強(qiáng)度高于健康人血清。
乙肝和丙肝患者血清的拉曼光譜譜線波峰及波段與健康人血清光譜差異很大,該技術(shù)可被視為診斷乙肝和丙肝的有效工具。亦有研究表明,充分利用表面增強(qiáng)拉曼散射的“指紋圖譜”分析優(yōu)勢,利用DNA探針將拉曼活性分子與靶核酸連接,通過對(duì)DNA探針上拉曼活性分子信號(hào)變化的檢測和分析,可提高新型冠狀病毒核酸檢測的靈敏度與特異度。
血糖異常檢測
糖尿病是一種影響全球4.22億人的慢性非傳染性**。目前*先進(jìn)的血糖監(jiān)測器也需要患者每天取數(shù)次指間血,這種方法不僅有創(chuàng)、不便,而且有感染風(fēng)險(xiǎn)。在不同光學(xué)技術(shù)中,拉曼光譜是用無創(chuàng)技術(shù)診斷***有前景的光學(xué)方法之一。
有研究者使用拉曼光譜儀采集12名志愿者微血管血糖的拉曼光譜來預(yù)測血糖,結(jié)果顯示激光聚焦甲襞微血管獲得的拉曼光譜峰在650、758、837、945、978、1004、1130、1163、1217、1551、1660cm-1處很明顯,且比健康人血清譜峰要高,這些譜峰同樣也存在于血液中。這表明可以使用無創(chuàng)的方法在體表進(jìn)行臨床范圍可接受的血糖預(yù)測,對(duì)研究無創(chuàng)血糖檢測具有重要意義,而且這種**的方法還可以促進(jìn)其他血液成分的非侵入性檢測。
基于拉曼光譜技術(shù)對(duì)樣品的定性及定量分析
定性和定量分析是拉曼光譜應(yīng)用于物質(zhì)分析科學(xué)中兩個(gè)*重要的方面。不同分子物質(zhì)有不同特征的拉曼光譜譜線,故可以用于物質(zhì)分子定性與結(jié)構(gòu)分析。光譜波峰的強(qiáng)度與分子物質(zhì)濃度成正比,因此可用于物質(zhì)的定量分析。
拉曼光譜分析法在臨床上可用于對(duì)血紅蛋白含氧量的檢測。拉曼光譜分析法可以對(duì)樣品進(jìn)行快速、簡單、可重復(fù)、無損傷的定性、定量分析,可以利用拉曼光譜這一特點(diǎn),對(duì)血脂異?;颊哐暹M(jìn)行各血脂成分的定性及定量分析。
便攜拉曼光譜儀的原理及應(yīng)用
便攜拉曼光譜儀工作原理與大型拉曼光譜儀的工作原理相似,先是由光譜儀激光器發(fā)出一束激光聚焦在被測物體上,然后用探頭收集散射光,并濾去頻率沒有變化的散射光,再利用內(nèi)置光柵對(duì)不同波長的散射光進(jìn)行分離,*后對(duì)光譜進(jìn)行收集和記錄,并轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)后*終輸出,得到拉曼光譜。
為了使用拉曼光譜對(duì)人體進(jìn)行快速、簡單、可重復(fù)、無損傷的定性、定量分析,在**方面需要較低的激光功率來保證人體不受損害。目前除了布魯克BRAVO,沒有其他手持式拉曼光譜儀在所有工作模式下被歸類為激光**。因此,使用布魯克BRAVO成了拉曼光譜測量人體的上上之選。
BRUKER手持式拉曼光譜儀——BRAVO:
l 激光**等級(jí)1級(jí)、操作更**;
l SSE–連續(xù)移頻激發(fā) (**)、有效去除熒光;
l Duo LASER 雙激發(fā)波長、擴(kuò)展到C-H的測量區(qū)域;
l IntelliTip -自動(dòng)識(shí)別智能測試頭、滿足固體和液體樣品;
l 內(nèi)置式波數(shù)校正技術(shù),確保波數(shù)的長期穩(wěn)定性;
l 直觀的、向?qū)接|屏操作,與智能手機(jī)類似,可自動(dòng)批量掃描報(bào)告;
l BRUKER 德國品質(zhì)的穩(wěn)定、**的光學(xué)系統(tǒng);
l 符合21 CFR part 11認(rèn)證要求。